Katalazın sefadeks destek G-100 üzerinde tutuklanması

Abstract

Katalaz enzimi bir polisakkarit olan sefadeks G-100 destek üzerinde adsorbe edilerek tutuklandı. Serbest katalaz ve tutuklu katalaz için optimum sıcaklık, optimum pH, termal kararlılık, saklama kararlılığı, kullanım kararlılığı ve kinetik sabitlerin belirlenmesi çalışmaları gerçekleştirildi. Serbest katalaz ve sefadeks G-100 destek üzerinde tutuklu katalaz için optimum sıcaklık 25 °C olarak, optimum pH ise 7 olarak bulundu. Serbest katalaz için Km = 25.16 mM, Vmax = 24042 $\mu$mol (dk mg protein)-1, sefadeks G-100 destek üzerinde tutuklu katalaz için Km = 28.03 mM, Vmax = 6553 $\mu$mol (dk mg protein)-l olarak bulundu. Serbest katalaz ile tutuklu katalaz için Km değerlerinde yok denecek kadar küçük değişiklikler gözlenirken, serbest katalazın maksimum hızı ile sefadeks G-100 destek üzerinde tutuklu katalazın maksimum hızları arasında fark olduğu katalazın tutuklanmasıyla maksimum hızında düşüş meydana geldiği gözlendi.

Catalase was immobilized by adsorption on the sephadex G-100 support that is a polysaccharide. Studies, for free catalase and immobilized catalase on sephadex G-100 support concerning the determination of optimum temparature, optimum pH, thermal stability, reusability and kinetic parameters were done. It was determined that optimum temperature for free catalase and immobilized catalase sephadex G-100 support is 25 °C, and optimum pH is 7. It was found as Km = 25.16 mM, Vmax = 24042 $\mu$mol (dk mg protein)-1 for free catalase, Km = 28.03 mM, Vmax = 6553 $\mu$mol (dk mg protein)-1 immobilized catalase on sephadex G-100 support. It was observed that there was difference between Vmax of the free catalase and Vmax of immobilized catalase on sephadex G-100 support while being observed minor changes in value of Km for free catalase and immobilized catalase and that a fall in the Vmax of the catalase through immobilization.