İnsan plasental glutatyon S-transferazının izolasyonu, kinetik özellikleri ve bazı ilaçlarla in vitro etkileşimi

Abstract

Plasental glutatyon-S-transferaz (GST-n) enzimi myiadında doğum yapmış olgunun plasentasından glutatyon agaroz affinite kolonu kullanılarak izole edildi. GST-n 2628 umol/mg dk spesifik aktivite ve % 0,5 verimle saflaştırıldı. Enzimin substratı olan glutatyon ( GSH ) için Km değeri 2 mM, Vmax değeri 11.1 U/mg dk; kloro-2,4-dinitrobenzen ( CDNB ) için Km değeri 0,55mM, Vmax değeri 35.0 U/mg dk olarak bulundu. İlaç etkileşimi çalışmalarında, prematüre doğumların önlenmesinde kullanılan Pre-Par® (Ritodrin HCL) ve antibakteriyel etkili Ampisid® (Ampisilin), enzim aktivitesini in vitro olarak % 50-55 oranında inhibe ettiği gözlendi. Antiemetik olarak kullanılan Metpamid® (Metoclopramid) enzim aktivitesini %80-85 oranında inhibe ederken, klinik kullanımı oldukça yaygın olan, ağrı kesici ve ateş düşürücü etkili Novaljin® (Metamizol), enzim aktivitesini % 70-80 oranında inhibe etti.Yine anti-bakteriyel etkileri olan lesef® (Ceftriaxon) ve Sultasid® (Sultamisilin)'in .ise enzim aktivitesini %10-15 oranında inhibe ettiği gözlendi. Bu bulgular bu tür ilaçların hamilelerde çok titiz ve dikkatli bir seçimle kullanılması gereğini ortaya koymaktadır.

Placental GST-n was isolated from full-term placenta by glutathione affinity column. GST was obtained with 0,5 % yield and had a specific activity of 2628 units per milligram protein. Km and Vmax values for glutathione (GSH) and chloro-2,4-dinitrobenzen (CDNB) as substrates were 2mM, 11,1 U/mg min and 0,55 mM, 35,0 U/mg min respectively. it was observed that GST activity was decreased 50-55% by Pre-Par® (Ritodrine HCL) used to prevent the premature birth. Metpamid® (Metoclopramid), an antiemetic, inhibited the enzyme activity 80-85%. Novalgine® (Metamizole), known as an analgesic and antipyretic, is also inhibited enzyme activity 70-80%.In addition to these drugs Sultacide® (Sultamisilin) and lesef® (Ceftriaxon) which have an antibacterial effect inhibited the enzyme activity 10-20%. These results suggested that these drugs must be used carefully in pregnant women.